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提交:2019年12月20日|批准:2020年1月21日|发表:2020年1月22日
本文引用:莫·K,科Antiuropathogenic和抗氧化活动Hypoxishemerocallidea林。从其分类学的提取和化合物相关的物种。拱制药制药科学。2020;4:001 - 009。
DOI:10.29328 / journal.apps.1001020
ORCiD:orcid.org/0000 - 0001 - 8178 - 1221
版权许可:©2020·K, et al。这是一个开放存取物品在知识共享归属许可下必威体育西汉姆联发布的,它允许无限制的使用,分布,在任何介质,和繁殖提供了最初的工作是正确引用。
关键词:抗菌;抗氧化剂;Galpinoside;Hemerocalloside;尿路病原体
Antiuropathogenic和抗氧化剂的活动Hypoxishemerocallidea林。提取,从其分类学的化合物相关的物种
Kokoette巴赛1*和Sekelwa科2
1制药科学单位,学院制药、Sefako Makgatho健康科学大学Ga-Rankuwa,南非
2微生物学,生物化学遗传学和微生物学,比勒陀利亚,南非比勒陀利亚大学
*通信地址:Kokoette·制药科学单位,学院制药、Sefako Makgatho健康科学大学。P。O-Box, 60, Medunsa, Ga-Rankuwa, Pretoria, 0204, South Africa, Tel: +27792836751; Email: Edward.bassey@smu.ac.za
Hypoxishemerocallidea林是一个43岁Hypoxis物种在南非,广泛销售柜台草药产品管理的几种疾病。植物功效hypoxoside 4商业产品链接,其糖苷配基(rooperol),或β-sitosterol。本研究调查的抗菌和抗氧化活动四个其他分子和两个提取物Hypoxis工厂。视觉抗氧化检测极限和自由基清除活性的测试样品测定使用过氧化氢20毫米,0.4毫米DPPH或铁降低抗氧化能力测定。定量自由基被分光光度法测定抗菌活性评价时对尿路病原体:使用麦克风金黄色葡萄球菌(ATCC25923),美国marcescens(写明ATCC 14041),铜绿假单胞菌(写明ATCC 9721),p .奇异君子兰(写明ATCC 33583)和大肠杆菌(写明ATCC 10536)。
抗氧化活动的视觉检测极限0.06毫克/毫升和自由基清除活性百分比(IC50= 0.048 - 0.032毫克/毫升)纯化合物1 - 4和(集成电路50= 0.037 - 0.039毫克/毫升)中提取得到。减少功率集成电路50介于0.15 - 0.23毫克/毫升之间提取和0.11 - -0.35毫克/毫升标准。抗菌潜力表现出引人注目的温和的MIC值的0.20 - 1.56毫克/毫升金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25923),美国marcescens(写明ATCC 14041),铜绿假单胞菌(写明ATCC 9721),p .奇异君子兰(写明ATCC 33583)和大肠杆菌(写明ATCC 10536)。Galpinoside 5 hemerocalloside 3和curculigoside C 2其他活性化合物Hypoxis工厂。
Hypoxishemerocallidea林。(h . hemerocallidea)Hypoxidacea属的多年生草本药用植物,广泛分布在撒哈拉以南非洲地区,特别是非洲的南部。坊间证据强调了植物的浸剂和煎剂在南非传统的医疗保健系统。值得注意的是使用植物球茎极性提取物在尿路感染等疾病的管理,普通感冒、流感、恶心[1],前列腺肥大[2]。除了传统的使用,在体外和在活的有机体内研究表明植物提取物具有抗氧化、抗糖尿病的作用[3],抗痉挛的,抗菌、antidiarrhoeal,免疫调节,uterolytic bronchorelaxant, CD4细胞计数减少药理属性[4]。一些植物化学物质包括但不限于hypoxoside 4, dehydroxy hypoxoside,双dehydroxy hypoxoside [5], nyasoside、nyasicoside mononyasine A, B和nyaside mononyasine [6], interjectin,香叶醇,obtuside, obtuside B[7],玉米素及其糖苷[8],被孤立于植物。巴赛和同事[9]报道其他七个化合物包括galpinoside 5 orcinal糖苷,香叶醇糖苷1和curculigoside C 2从分类学的相关h . colchicifolia和h . galpinii。然而,知名极地植物提取物的药用价值与药物前体hypoxoside 4,其aglycone-rooperol或β-sitosterol。因此,本研究调查的抗氧化活动galpinoside 5 hemerocalloside 3 curculigoside C 2,和香叶醇糖苷1,在场的其他分子h . hemerocallidea或相关的物种。这些分子的抗菌活性与选定的尿路病原体也被调查。大量的细菌病原体与尿路包括有关金黄色葡萄球菌,变形杆菌,铜绿假单胞菌,克雷伯氏菌肺炎,克雷伯氏菌oxytoca,枸橼酸杆菌属freundii,肠杆菌属下水道,和粘质沙雷氏菌和其他很多。大肠杆菌尿路感染是最常见的病因代理人的(尿)在医院和社区获得性感染。根据Bitew, et al。[10],尿路病原体感染与相关门诊率大于或等于600万,仅在美国每年479000人住院。而产生的治疗费用估计超过24.7亿美元。因此,尿路与抗生素耐药性的增加在医院设置[11]。细菌性尿路病原体的形象已经彻彻底底地改变了多年来由于他们的进化适应性策略导致抗生素耐药性(10、12、13)。出于这个原因,就必须搜索和筛选更多针对耐药病原体的抗菌潜力。本研究探索潜在的抗菌活性h . hemerocallidea提取和化合物1 - 5孤立或分类学的相关h . colchicifolia和h . galpinii提到细菌性尿路病原体。
试剂和溶剂
所有溶剂的分析(AR)等级。甲醇(甲醇)、乙醇(EtOH)、丙酮、氯仿(CHCl3),硫酸,抗坏血酸,2,2-dipicryl-diphenyl hydrazyl (DPPH),阿莫西林,ciprofloxin,仅有Bertani(磅)软琼脂或穆勒辛顿(MH)琼脂购买从罗谢尔化学品及实验室设备CC,南部丘陵或Sigma-Aldrich,南非约翰内斯堡。
植物材料和标准化合物
原油水和甲醇提取物h . hemerocallidea以及五个纯化合物hypoxoside 4, galpinoside 5 hemerocalloside 3 curculigoside C 2和香叶醇糖苷1 UPLC-MS纯度为95%是从一项研究获得的。每个标准化合物的降解可能是确认使用薄层色谱分析每个复合开发的氯仿:甲醇:水(CHCl3H:甲醇:2O 70:30:2 v / v / v)。阻滞系数(Rf)值为每个化合物与文献相同的化合物分析使用相同的流动相[9]。
定性的自由基清除DPPH•污点染色试验(抗氧化剂)
视觉检测极限的决心:定性测试样品的自由基清除活性和控制被我和同事调查使用的方法描述和少量修改[14]。使用玻璃牧场吸管、5滴的水和甲醇提取物h . hemerocallidea以及标准化合物(hypoxoside 4, galpinoside 5, hemerocalloside 3, curculigoside C 2和香叶醇糖苷1)分别发现了在5 x 5厘米硅胶板玻璃板块(硅胶60 F254、默克公司、德国)并使用溪表风扇空气干燥。修改包括样本浓度发现如下:1.0,0.5,0.1,0.09,0.08,0.07,0.06,0.05和0.01毫克/毫升的提取物、标准和维生素C(积极的控制)。0.4毫米(1.57 g DPPH / 10毫升甲醇)解决方案准备立即点污点涂在薄层色谱板用药棉。
定量测定抗氧化活性(在体外DPPH、过氧化氢自由基清除实验和铁降低抗氧化能力):定量抗氧化活动(AOXA或% DPPH)检查使用分光光度法测量1,1-diphenyl-dipicryl hydrazyl DPPH自由基清除实验。1.0毫升的1.0,0.5,0.1,0.08,和0.05毫克/毫升的水,甲醇提取的h . hemerocallidea,5标准(1 - 5)混合1毫升甲醇的0.4毫米DPPH的解决方案。在室温下反应混合物被允许在黑暗中30分钟。空白解决方案1.0毫升DPPH + 1.0毫升甲醇作为负控制而L-ascorbic酸(维生素C)和0.4毫米的DPPH积极控制。实验一式三份和平均值都记录下来。过氧化氢自由基清除实验做了相同的协议使用30%的20毫米w H / v2O2混合了PBS (pH = 7.67)。两毫升(2.0毫升)过氧化氢混合1.0毫升的每个连续稀释(1.0,0.5,0.1,0.08,和0.05毫克/毫升)测试样品溶液分别允许在黑暗中反应之前阅读吸光度。消极的控制是H2O2pbs溶液没有测试样品,而维生素C是积极的控制。减少吸光度测量在518 nm和230 nm DPPH和H2O2使用分光光度计分别测定(分光光度计Nanocolor®uv / vis Macherey-Nagel GmbH & Co . KG,德国)。铁还原能力抗氧化(收紧)使用测试提取物进行了测定,标准和控制。植物提取物、工作标准和控制解决方案由稀释1毫克/毫升原液1.0,0.5,0.1,0.08和0.05毫克/毫升。毫升(1.0毫升)的工作解决植物提取物、标准和控制与2.5毫升的0.2米混合磷酸盐缓冲剂(pH值6.60)和2.5毫升的1% (w / v)铁氰化钾溶液(K3 (Fe (CN) 6))。混合物是漩涡,然后孵化在50°C水浴20分钟。此后,2.5毫升的10% (w / v)添加了三氯乙酸,然后在3000转离心10分钟。体积2.5毫升的上层清液转移到试管中,混合和0.5毫升的0.1% (w / v)氯化铁溶液的解决方案。混合物是涡和吸光度增加使用上述分光光度计测量700海里。值被转换为百分比获得抗氧化活性(% DPPH)使用公式:
% = (DPPH清除能力0——一个年代/一个0)x 100 (1)
A0表明吸光度的负控制1.0毫升的DPPH解决方案+ 1.0毫升的甲醇,2.0毫升的H2O2PBS或2.5毫升的上层清液+ 0.5毫升氯化铁解决方案和代表积极的吸光度控制- 1.0毫升的DPPH解决方案+ 1.0毫升,2.0毫升H2O2pbs溶液或2.5毫升上层清液+ 0.5毫升的氯化铁和1.0毫升的提取物,标准或维生素C的解决方案。
点状污点抗菌bio-autography:抗菌素的点状斑bio-autography被我和同事进行了描述与修改[14]。5 * 5厘米硅胶板玻璃板块(硅胶60 F254、默克公司、德国)对角分成两个相等的两半。五个玻璃牧场吸管滴1.0毫克/毫升的水,甲醇提取物或标准化合物(hypoxoside 4, galpinoside 5, hemerocalloside 3, curculigoside C 2和香叶醇糖苷1)板的底部角落被发现。环丙沙星和阿莫西林(0.1毫克/毫升)积极控制被发现在顶部角落的薄层色谱板。表迷的板是用一条小溪干空气。大约5毫升的Luria Bertani(磅)软琼脂或穆勒辛顿(MH)琼脂溶液与0.5毫升的播种金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25923),美国marcescens(写明ATCC 14041),铜绿假单胞菌(写明ATCC 9721), p . mirabillis(写明ATCC 33583)和大肠杆菌(写明ATCC 10536)准备在一夜之间在0.05麦克法兰标准和标准化,涌上准备的点状TLC板。板块在37⁰C孵化24小时,之后区抑制出现的奶油白色墨迹或明确的一种红色(美国marcescens)或奶油白色(金黄色葡萄球菌,p . mirabillis和大肠杆菌)或green-yellowish (铜绿假单胞菌)色素背景观察。
抗菌最低抑制(MIC)到96 -试验:的细菌培养金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25923),美国marcescens(写明ATCC 14041),铜绿假单胞菌(写明ATCC 9721), p . mirabillis(写明ATCC 33583)和大肠杆菌(写明ATCC 10536)种植18 - 24小时37°C和OD之后调整600海里0.08 - -0.1。96 -聚苯乙烯微量滴定板分析是用来确定提取物抑制细菌生长的最低浓度[15]。双重的连续稀释法是用于确定麦克风值。短暂,整除(100μl) 25毫克/毫升原油提取和1毫克/毫升孤立纯标准化合物连续稀释与穆勒辛顿(MH)汤在每个。100 -μl整除的标准化的细菌悬液添加到每个。穆勒辛顿肉汤和1% DMSO作为消极和溶剂控制,分别。环丙沙星(0.01毫克/毫升),阿莫西林(0.01毫克/毫升)使用积极的控制。帕拉-iodonitrotetrazolium (INT, 0.2毫克/毫升)40μL添加24小时后的孵化,孵化以后进一步30分钟到1个小时直到最佳显色。测试进行了一式三份。麦克风记录的最低浓度提取/隔离标准化合物抑制细菌生长所描述的波夫和Eloff [15]。
标准化合物的纯化和鉴定
每个标准的稳定化合物用于本研究证实使用简单的TLC CHCl发达3H:甲醇:2O (70:30 2 v / v / v)。紧凑的单一景点为每个化合物得到与射频(0.76,0.50,0.47,0.45,0.43,香叶醇糖苷1,curculigoside C 2, hemerocalloside 3 hypoxoside 4和galpinoside 5 -图1。Rf值使用相同的流动相匹配的那些之前报道[9]。
图1:香叶醇糖苷结构1,curculigoside C 2, hemerocalloside 3 hypoxoside 4和galpinoside 5、标准化合物用于这项研究。
视觉检测极限的定性自由基清除DPPH(抗氧化剂)
点状染色试验:点状染色测试是优于经典的TLC bio-autography评价定性的抗氧化活性Hypoxis提取,使用标准(hypoxoside 4, galpinoside 5, hemerocalloside 3, curculigoside C 2,香叶醇糖苷1)和L-ascorbic酸(维生素C)是一个积极的控制。结果(图2)表明,galpinoside 5和hemerocalloside 3展览自由基清除特性与抗坏血酸的从紫色的黄白漂白DPPH背景。
建立了黄白颜色的厚度,Hypoxishemerocallidea甲醇和水提取物还表示相对温和的抗氧化活性比hypoxoside 4,最商业的分子Hypoxis物种(图2)。检测极限,LOD的分析仪器或方法往往是决定通过注入浓度很低,(通常≤1毫克/毫升)的anlyte到仪器和使用曲线下的面积(AUC)来确定能被探测到的最低浓度。这项研究中,实现了这个想法,发现1.0 - 0.001毫克/毫升Hypoxishemerocallidea水和甲醇提取物、标准galpinoside 5、hemerocalloside 3 curculigoside C 2和香叶醇糖苷1(图2底部)在TLC玻璃板想象他们的抗氧化活动检测极限。Hypoxoside 4,表示温和的自由基清除活性与视觉检测极限0.1毫克/毫升的价值,价值的Hypoxishemerocallidea水提取物(图2底部)。的抗氧化活动galpinoside 5, hemerocalloside 3标准和甲醇提取从未被报告过。我们的研究结果显示DPPH自由基清除视觉的LOD值0.06毫克/毫升与维生素C,而积极的控制的痕迹curculigoside C 2观察视觉LOD 1毫克/毫升的奶油变色紫色DPPH衰落在几秒钟内,香叶醇糖苷1中没有视觉检测浓度范围进行了研究。
图2:点状污渍表明抗氧化活动Hypoxishemerocallidea甲醇和水提取、标准和维生素C对DPPH(上)和视觉抗氧化剂LOD测定使用的点污点染色试验Hypoxishemerocalloside提取物、标准和积极控制浓度1.0 - -0.001毫克/毫升(底部)。
定量测定抗氧化活性(在体外DPPH和H2O2自由基清除实验)
的在体外定量抗氧化活动是由相同的提取分析,确定标准和积极控制用于定性DPPH视觉LOD化验。这是非常重要的,进一步证实的抗氧化活性h . hemerocallidea甲醇提取,galpinoside 5, hemerocalloside 3和维生素C具有相同视觉抗氧化剂LOD 0.06毫克/毫升。
同样的原因也需要在体外抗氧化活性评价h . hemerocallidea水提取物和hypoxoside 4,表现出相同的视觉抗氧化剂LOD 0.1毫克/毫升。图3描述了吸光度与浓度的函数Hypoxis提取、标准和维生素c。减少吸光度的DPPH(图3)和H2O2(图4)是一个表示程度的提取和标准化合物可以抑制DPPH和H2O2激进的一代活动[14]。这是与测试样品的自由基清除活性。相反,收紧的增加吸光度测定(图5)进一步验证测试样品的抗氧化潜力。三种抗氧化剂化验的结果符合结果的视觉LOD定性抗氧化活动获得使用点污点分析galpinoside 5,显示一个自由基清除能力与抗坏血酸相当。
图3:DPPH absorbance-concentration函数(一)抑制百分比在518 nm的DPPHh . hemerocallidea提取物(水,甲醇),标准和维生素c。每个值表示为平均值±标准偏差(n = 3)
图4:H2O2absorbance-concentration函数抑制H (A)百分比2O2在230纳米h . hemerocallidea提取物(水,甲醇),标准和维生素c。每个值表示为平均值±标准偏差(n = 3)。
图5:菲3 +对菲2 +还原能力的测试h . hemerocallidea提取、标准和维生素c。每个值表示为平均值±标准偏差(n = 3)。
比例的自由基清除活性测试h . hemerocallidea提取、标准和维生素C进行评估,进一步验证提取的程度和标准化合物可以抑制DPPH和H2O2激进的一代活动以及减少铁3 +对菲2 +。显示(图3 b-5b和表1),galpinoside 5,表现出与IC强有力的抗氧化活性50= 0.030 (DPPH), 0.04 (H2O2毫克/毫升)还原能力(IC50= 0.17)与维生素C, IC50= 0.028 (DPPH), 0.038 (H2O2)(0.11)分别毫克/毫升。其次是hemerocalloside 3,甲醇提取平均IC50= 0.041毫克/毫升)和IC50= 0.056毫克/毫升分别对自由基的测试方法。而curculigoside C 2 DPPH IC50= 0.045毫克/毫升和hypoxoside 4 (IC50= 0.037)一对一,香叶醇糖苷1,表现出抗氧化活性最低的百分比(IC50= 0.048毫克/毫升)。
表1:计算集成电路50表明自由基活性的百分比Hypoxis水,甲醇提取物、标准galpinoside 5 hemerocalloside 3 curculigoside C 2,香叶醇糖苷1和维生素C积极控制。 | |||
Anlyte | 彻底清除试验费用 | ||
DPPH集成电路50(毫克/毫升) | H2O2集成电路50(毫克/毫升) | 收紧集成电路50(毫克/毫升) | |
h . hemerocallidea水提取物 | 0.037±0.10 | 0.08±1.29 | 0.23±2.58 |
h . hemerocallidea甲醇提取 | 0.039±1.40 | 0.073±2.04 | 0.15±1.25 |
Hypoxoside (4) | 0.037±0.97 | 0.09±1.40 | 0.35±2.87 |
Galpinoside (5) | 0.030±1.40 | 0.04±1.30 | 0.17±2.62 |
Hemerocalloside (3) | 0.032±0.98 | 0.05±1.44 | 0.20±2.64 |
Curculigoside C (2) | 0.045±1.42 | Nd | Nd |
香叶醇糖苷(1) | 0.48±1.41 | Nd | Nd |
维生素C | 0.028±0.97 | 0.038±1.08 | 0.11±2.91 |
Nd:不确定,由于有限的测试标准。 |
抗菌bio-autography点状污点
点污点染色试验(图6)显示,只有水提取物抑制表示积极的改变美国marcescens所代表的区域面积水提取物的抑制。然而,甲醇和水提取物h . hemerocallidea显示抑制活动对金黄色葡萄球菌,美国marcescens和铜绿假单胞菌。从标准化合物,只有curculigoside C 2,抑制大肠杆菌3.13毫克/毫升的麦克风。hemerocalloside galpinoside Hypoxoside 4日5日3和香叶醇糖苷1,表现出没有抗菌活动。
图6:选择抗菌点状染色生物自显影法。左:美国marcescens绿脓和右:P。CIP(环丙沙星0.01毫克/毫升),AMO(阿莫西林0.01毫克/毫升),W(水提取物h . hemerocallidea)和M(甲醇提取的h . hemerocallidea)。
最小抑制浓度(麦克风)
测试样品(麦克风值Hypoxis水,甲醇提取物、标准galpinoside 5 hemerocalloside 3 curculigoside C 2,香叶醇糖苷对测试病原体(1),展示活动铜绿假单胞菌,金黄色葡萄球菌,美国marcescens,p .奇异君子兰和大肠杆菌表2中给出。从这些发现h . hemerocallidea水提取物显示≤1毫克/毫升的有力和值得注意的活动对所有测试病原体除了[17]铜绿假单胞菌。h . hemerocallidea水提取物(MIC值为0.78毫克/毫升)抑制金黄色葡萄球菌和美国marcescens,0.39毫克/毫升抑制p .奇异君子兰和最好的麦克风0.20毫克/毫升大肠杆菌也观察到。1.56毫克/毫升的麦克风价值至少相同的提取物抑制铜绿假单胞菌。相比之下,甲醇提取物的麦克风值介于1.56和3.13毫克/毫升之间不像“引人注目”,因为提取展览麦克风> 1毫克/毫升[17]。甲醇提取(麦克风= 1.56毫克/毫升)表示反对金黄色葡萄球菌,而美国marcescens,铜绿假单胞菌,p .奇异君子兰和大肠杆菌被抑制在麦克风= 3.13毫克/毫升。所有的隔离测试纯化合物抑制病原体的浓度为0.25毫克/毫升除了curculigoside C 2,这表现出麦克风= 0.13毫克/毫升大肠杆菌。这个观察进一步证实大肠杆菌更容易提取和化合物的h . hemerocallidea。相比,环丙沙星和阿莫西林(MIC范围0.003 - 0.25毫克/毫升和0.01 - 0.25毫克/毫升);h . hemerocallidea水提取物(麦克风0.20毫克/毫升大肠杆菌)、curculigoside C 2 (MIC范围0.13 - 0.25毫克/毫升)记录。类似的结果观察galpinoside 5, hemerocalloside 3, hypoxoside 4(所有三个麦克风为0.25毫克/毫升)。这些结果表明≤0.25 mg / mL,该阈值的MIC值Hypoxis植物极性提取物,孤立的标准相对于商业抗生素环丙沙星和阿莫西林。
表2:最低抑制浓度(毫克/毫升)Hypoxishemerocallidea水,甲醇提取纯分离化合物和积极控制对选定的尿路病原体。 | |||||
测试样品 | 麦克风(毫克/毫升) | ||||
植物提取物 | 金黄色葡萄球菌 | 美国marcescens | 铜绿假单胞菌 | p .奇异君子兰 | 大肠杆菌 |
水 | 0.78 | 0.78 | 1.56 | 0.39 | 0.20 |
甲醇 | 1.56 | 3.13 | 3.13 | 3.13 | 3.13 |
化合物 | |||||
Galpinoside | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
Hemerocalloside | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
Hypoxoside | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | |
Curculigoside C | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.13 |
控制 | |||||
环丙沙星 | 0.003 | 0.003 | 0.003 | 0.003 | 0.25 |
阿莫西林 | 0.01 | 0.25 | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
1% DMSO溶液 | 6.25 | 6.25 | 6.25 | 6.25 | 6.25 |
孤立的标准化合物被确定使用文献引用hypoxoside 4, galpinoside 5 hemerocalloside 3 [9], curculigoside C 2和香叶醇糖苷1 [16]。Hypoxoside 4戊炔派生自然那些出现在每一个Hypoxis物种。然而,hypoxoside 4,可以hydrolyz rooperol葡糖苷酶酶的作用。尽管复合hypoxoside 4现在常见的孤立Hypoxishemerocallidea作为其主要化合物,它最初是孤立于其他Hypoxis物种包括h . obtusa。Hypoxoside 5是市场上重要的药用化合物[18]。Galpinoside 5,和其他以前从南非隔离Hypoxis物种,属次生代谢物的列表。尽管这些化合物被确定,没有抗菌和抗氧化活性进行了评价。
这项研究在此标识galpinoside 5 hemerocalloside 3和curculigoside C 2从极地极地酚类化合物分离提取的Hypoxis植物具有抗氧化活性的化合物。良好的抗氧化活性(0.01毫克/毫升的LOD) galpinoside 5日hemerocalloside 3,标准化合物的抗氧化活性从未被报道与植物的甲醇提取物、阳性对照与维生素C,而curculigoside C 2,有一个温和的视觉抗氧化活性的浓度1毫克/毫升和香叶醇糖苷1,没有。这个结果反映Mannathoko和同事报道[19]类似0.05毫克/毫升甲醇提取物的抗氧化活性h . hemerocallidea球茎和维生素C(抗坏血酸)。galpinoside 5的抗氧化活性的机理,和hemerocalloside 3,可以通过diacatechol-type (rooperol或去甲二氢愈创木酸)通路之前报道的其他组(20 - 21)。大多数化合物具有良好的抗氧化活动通常有3个,4-dihydroxy组负责减少自由基DPPH或H2O2解决方案。同样的原因也负责curculigoside C 2的相对贫穷的抗氧化活性,观察到1毫克/毫升3-hydroxy集团在其结构和香叶醇糖苷的零活动1,作为一个后果缺乏苯和羟基的结构。协同存在galpinoside 5日hemerocalloside 3和curculigoside C 2, catechol-type或rooperol-type methanolic提取的结构h . hemerocallidea应负责其相对更好的水提取物的抗氧化活动和hypoxoside 4。hypoxoside 4中的两个糖单元,将降低抗氧化活动。工作目前正在进行中在我们实验室比较的活动苷配基的活性抗氧化化合物rooperol,糖苷配基与抗氧化剂比父hypoxoside 4,前体药物。
当定量测定抗氧化活性(在体外DPPH, H2O2自由基清除实验和铁还原能力)和百分比进行抗氧化活动,结果(图3 - 5 b)凸显出最佳浓度为0.5毫克/毫升,最好的自由基清除属性甲醇提取,galpinoside 5 hemerocalloside 3和维生素C一方面和水提取物和hypoxoside 4。这是由于DPPH的吸光度,H2O2在这个浓度,氯化铁还原能力最低。这将意味着商业产品穆蒂包含Hypoxis提取和纯抗氧化化合物galpinoside 5和hemerocalloside 3必须保持这个最佳浓度最优抗氧化活性其他条件不变。甲醇提取,galpinoside 5和hemerocalloside 3有一个定量的自由基清除活性,相当的积极控制维生素C。然而,galpinoside 5将是最好的化合物类似抗氧化维生素C。其他分析物和维生素C有线性吸光度后浓度来表示一个可能的相似的自由基清除潜在相比,维生素C同意以前公布的结果[日]。自由基清除的结果百分比属性(IC 87.98%50galpinoside 5 = 0.030毫克/毫升),这一比例为89.93% (IC50= 0.028毫克/毫升)的维生素C和87.20% (IC50hemerocalloside 3 = 0.037毫克/毫升),支持那些之前报道(19日22)强调,极性提取物的新鲜叶子和生长情况具有较高的抗氧化活性与高度极性成分有关。这个推理是合理的从galpinoside 5和hemerocalloside 3的角度被高度极性化合物分离Hypoxis植物与溶解在甲醇和水。如前所述Katerere和Ellof[22],极地酚类化合物的抗氧化活动负责Hypoxishemerocallidea提取。从图2(底部),中度hypoxoside 4和抗氧化活性的h . hemerocallidea水提取物与视觉检测极限0.1毫克/毫升的价值是由于化合物缺乏dicatechol-type结构。
穷人温和水提取物的抗氧化活性和hypoxoside 4,被称赞的值得注意的麦克风0.39和0.20毫克/毫升p .奇异君子兰和大肠杆菌分别≤0.25 mg / mL hypoxoside 4和水提取物。细菌生长抑制大肠杆菌通过h . hemerocallidea水提取物略大于商业的活动环丙沙星MIC值为0.25毫克/毫升。这可能是一个函数之间的协同作用改善化合物的水提取物和甲醇提取。虽然萃取溶剂极性降低,抑制生物的极地提取的南非h . hemerocallidea增加。为例,丙酮<乙醇示范麦克风2.5毫克/毫升> 0.31毫克/毫升[23]和甲醇< H2O为3.13毫克/毫升> 0.20毫克/毫升(本研究)。Matotoka和Masoko[23]也记录h . hemerocallidea丙酮提取2.5毫克/毫升,0.63毫克/毫升,0.03毫克/毫升MIC值对铜绿假单胞菌,金黄色葡萄球菌和粪大肠,分别。
Galpinoside 5 hemerocalloside 3和hypoxoside 4 MIC值为0.25毫克/毫升的病原体同样环丙沙星对执行测试大肠杆菌和阿莫西林美国marcescens,铜绿假单胞菌,p .奇异君子兰和大肠杆菌(麦克风= 0.25毫克/毫升)。总的来说,curculigoside C 2,表现出突出的值得注意的抗菌特性大肠杆菌(麦克风= 0.13毫克/毫升)。这个活动是显著提高环丙沙星和阿莫西林(MIC = 0.25毫克/毫升)。有效的结果的合理化curculigoside C对所有测试病原体和行动的可能机制包括curculigoside C的结构;羟基的存在羟基在颈,颈的位置和苯环上的两个附近的含氧组[24]相比,环丙沙星和阿莫西林会证明这一点。这个浓度(0.25毫克/毫升)是临床上重要的制造商和用户的草药配方h . hemerocallidea极地提取和标准植物提取物分离出的化合物。额外的健康好处的消费者h . hemerocallidea特别是和其他产品Hypoxis物种一般不应仅仅是相关hypoxoside 4(或rooperol)和β-sitosterol。理由,额外的化合物如galpinoside 5, hemerocalloside 3和curculigoside C 2存在于极地提取特别具有的生物活性Hypoxis工厂表示在目前的研究。
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