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提交者:2020年4月11日核准数 :2020年4月23日发布日期:2020年4月24日

如何引用此文章QustiaF,RehanM,RiazS分子分析免疫球沙门氏菌印地语儿科病人ArchPatholClinRes2020年4: 005-010

DOI:10.29328/journal.apcr.1001017

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关键字 :普普里尔病prashid维达ImmnogloblinGmmmunugloblinM

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分子分析免疫球沙门氏菌印地语儿科病人

法拉库西一号默罕默德·里汉2和SamreenRiaz3*

一号旁遮普大学微生物学和分子遗传学系,巴基斯坦拉合尔
2ioT研究创新实验室研究官,Khwarizmi计算机科学学院,工程技术大学,巴基斯坦拉合尔
3旁遮普大学微生物学和分子遗传学系助理教授,巴基斯坦拉合尔

通讯通讯地址Samreen Riaz助理教授,旁遮普大学微生物学和分子遗传学系,巴基斯坦拉合尔,电子邮件:samreen.mmg@pu.edu.pk

台风热系统传播沙门氏菌进化血清类型印地语.这个问题在世界热带区域引起极大关注。最高的伤寒发烧事件发生在亚洲,即93%及早诊断疾病强制降低相关死亡率并防止出现抗菌药抗药性沙门氏菌印地语.拉合尔儿童医院免疫科进行了为期一年的研究工作,包括共60名疑似伤寒病人srum样本测试bashidotIgG和Igm抗体使用Widal测试反TH抗体共60名病人中,10名(16.7%)为prashidotIgG和IgM正数,16名(26.7%)为prashidotIgM正数,3名(5%)为prashidotIgG和Igm正数,31名(51.66%)为prashidotIgG和Igm负数阅读Widal测试结果后,8(13.33%)对Widal toTH抗原呈阳性,3(5%)对Widalto抗原呈阳性,19(31.7%)对WidalTH抗原呈阳性,30(50%)对Widal toTH抗原呈阴性Igm在急性伤寒发烧早期阶段呈阳性,Igm和IgG表示中度急性病仅检测IgG无法区分急性和恢复阶段,因为它可保留血清至少2年或2年以上伤寒测试对快速诊断伤寒大有帮助,比起Widal测试,Widal测试仍在使用,尽管大多过期化通过测试IgM和IgG抗体沙门氏菌印地语中分早期和后期检测

沙门氏菌进化感染是发展中国家输血流感染的共同归并原因在上述领域,它与高发量关系[1]相关Typhoid由gram阴性细菌引起沙门氏菌进化清空印地语可能是社区获取巴塞亚和世界范围死亡[2]的主要解释各种临床演示都与它相关联,它也与许多其他急性发病相重叠[3]可见肠热案例由沙门氏菌进化serovars印地语Paratyphi例行报告对幼儿和青少年有高度影响[4]热带国家城市和农村地区都存在儿童常见问题。特别是亚洲、非洲、东欧和拉丁美洲风险高 [3]亚洲大都受其93%全球事件的影响主要原因是卫生不良、卫生和排污系统差和人口超数[5]主流传播方式被认为是直接下降路径,但最近的证据表明间接环境传播可能进一步促成疾病传播[6]这个问题在像巴基斯坦这样的发达国家中仍日益严重[7]Salmonalla instica初始获取抗微生物抗传统一线药,如氯仿醇、安比锡林和三联双片-Sulphethoxole[1]产生抗生素抗药性的主要原因是因诊断检测结果不正确及其解释而延迟处理伤寒快速检验破伤风恢复对临床医生和病人[8]医生无法诊断台风热的临床特征,因为这些特征在常见感染中非常相似,如疟疾、登革热、伤寒、liptospirisis及早正确识别对快速有效处理举重[10]简单、可靠、负担得起和快速诊断解析表格识别总有血液培养和Widal测试台风热金标准为血液文化,但耗时[12]血液文化结果受抗生素使用前影响widal测试增加tips后产生正结果,而这往往无助于早期医疗[13]yashidot快速血清测试,目前商业上可获取并可靠识别伤寒热,即使资源有限[14]点形免疫检测识别光球IgM和IgG与50KD外膜蛋白沙门氏菌印地语.prashidot已被全科医生和顾问用为诊断伤寒的唯一工具[7]合理可靠的诊断测试,在无法获取或无法获取血液文化时,确定高指数疑似传染性疾病的患者中受资源限制的伤寒[8]

保持上述文献、目的和目标研究工作的目的是确定bashidotIgG和Igm抗体以及在疑似有伤寒的病人中使用Widal测试对to和TH抗体

包容标准

任一性别1至14岁病人

排除标准

发烧病人 某些确定焦点受感染

一年时间里,所有诊断怀疑伤寒的病人都被列入研究范围,向拉合尔儿童医院免疫系报告病人年龄介于1至14岁和男女,临床特征显示伤寒

数据采集和临床历史

数据采集和临床历史开发程序记录临床历史时参考参数有发烧、弱化、厌食症、拉肚子或便秘等异常肠状症、腹部疼痛、恶心、呕吐、咳嗽、胸部不适、喉咙痛和涂层舌头

样本收集

5c.c从每位病人反肿瘤静脉中无序采集血液血样离心分离血清分解为两部分

测试执行

serphid和Widal测试用血清样本诊断伤寒sbhidottes使用包是“马来西亚生物诊断研究SDNBHD,SingapaWidal测试使用Siofi定性解析测试包

协议打字测试

执行 webhidot测试反应盘划分成两列一栏标为M一栏标为G预点抗原条用推力清除并放入适当的反射井250微l样本稀释物添加到适当的M和G响应井托盘轻轻摇动以允许条状完全湿2.5ml控件或测试血清添加到适当的M或G响应井中,实现血清最后稀释1:100解决方案轻轻混合托盘求解程序由摇盘平台浸泡20分钟抗体解析法被浸入装有消毒剂的弃置罐250微l准备洗刷缓冲区加到每口井中并洗3X5分钟250微升预稀释反人类Igm加到M井中,250微升预稀释反人类Igg托盘覆盖15分钟室温二大后端抗体解析并洗3X5分钟250微l颜色开发解决方案加到井中盘子覆盖并嵌入摇杆平台允许15分钟开发色素阻塞反应方式是喷出溶液并短时间冲刷蒸水条(3X)。条纹放入文件文档干燥后结果被解读为:

负结果 :反元涂条和开始反应前一样空

阳性结果 :反元涂条显示两点蓝阳性IgM推断为急性伤病,而IgM和IgG则推断为中度急性伤病,IgG推断为慢性载波或先前感染或复发

协议Widal测试

测试试剂和样本带入室温度抗原小瓶重新缓缓悬浮清晰玻璃滑动供测试的每样样本均分80、40、10和5微l分解滑动片圈(稀释1/20、1/40、1/80、1/160和1/320分解式滑动片圈)。40微升适当抗原悬浮(O或H)加到血清滴旁滑动手动轻轻摇动一分钟结果解读如下:

负结果:平滑悬浮无可见分解

阳性结果 :任何程度分解可见微镜1/160或以上轮胎对to或TH抗原被认为对伤寒热有阳性

研究共包括60名疑似有伤寒的男女病人,他们向拉合尔儿童医院报到并转介免疫科诊断伤寒

学习群N级小儿病人疑似有伤寒38(63%)为男性,而22(37%)为女性,男性比例为1.7:1(图1a)。

在所有60名病人中,10名(16.66%)为prashidotIgG和IgM阳性,16名(26.66%)为prashidotlgM正性,3名(5%)为prashidotIgG正性,31名(51.66%)为prashidotIgG和Igm负性(图1b)。


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图1a:儿科病人性别分布b:疑似染色热的bashidotIgG和IgM结果N级=60)

共诊断出10名prashidot阳性结果的病人,在这些例子中,受影响的男女人数相等。16名prashidotIgM阳性病人中11名男性(68.75%)和5名女性(31.25%)。yashidotIgG阳性病人全部为女性(100%)。其余31rapsidotlggm和Igm负病人中23名(74.19%)为男性,8名(25.80%)为女性在所有病人中N级=60,根据发烧持续时间计算,11名病人发烧7天以下(18.33%),23名病人发烧7至14天以上(38.33%),26名病人发烧14天以上(图2a)。

7天2度以下发烧的病人中(3.33%)prashidotlgm和lgm均呈阳性,没有病人(0 %)prashidotIggg或rashidotIgm均呈阳性,9个人(15%)prashidotIggg和igm均呈阴性7至14天发烧病人中,4例(6.66%)为prashidotIgG和IgM阳性,7例(11.66%)为prashidotIgM阳性,0例(0例)为prashidotIgG阳性,12例(20%)为prashidotIgG和Igm阴性14天以上发烧的病人中,4天(6.66%)为prashidotIgG和IgM阳性,9天(15%)为prashidotIgM正数,3天(5%)为prashidotIgG正数,10天(16.66%)为prashidotIgG和Igm负数(图2b)。


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图2a:疑似伤寒患者发烧持续时间N级=60)b:bashidotIgG和Igm结果显示疑似伤寒患者发烧持续时间

在这次研究中,用Widalto和TH抗原诊断伤寒结果显示,在全部病人中(参院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院院N级+++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++

8名阳性Widal to和TH抗原患者中,同样数目的男性和女性受到影响3名阳性Widalto抗原全为男性(100%),19名阳性WidalTH抗原10为男性(52.63%),9名女(47.36%)。其余30名Widal to和TH负病人中23名(76.66%)为男性,7名(23.33%)为女性7天以下发烧的病人中,1(1.66%)对Widal toTh抗原呈阳性,Widalto抗原无0(0)阳性,2(3.33%)对WidalTh抗原呈阳性,8(13.33%)对Widal toTh抗原呈阴性7-14天发热的病人中,Widal toTH抗原呈阳性(1.66%)、Widal toTH抗原呈阳性2(3.33%)、Widalto抗原呈阳性5(8.33%)和WidalTH抗原呈阳性15(25%)。发烧14天以上者中6天(10%)为Widal toTH抗原阳性者1天(1.66%)为Widal to抗原阳性者12天(20%)为WidalTH抗原阳性者7天(11.66%)为Widal toTH抗原阴性者3b图3b


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图3a:疑似伤寒患者Widal to和TH抗原结果N级=60b:Widalto和TH抗原结果,按疑似有伤寒患者发烧持续时间N级=60)

在当前研究中,临床诊断是根据物理检验的一套症状和结果作出的。常见诊断疑似伤寒N级=60发烧60发(100%)、腹部疼痛45发(75%)、恶心38发(63.33%)、呕吐40发(66.66%)、腹泻35发(58.33%)、便秘15发(25%)、咳嗽40发(66.66%)、胸部不适34发(56.66%)、喉咙37发(61.66%)、涂舌42发(70%)、厌食54发作(90%)和弱缺58发(96.66%)(表1)。

N级=4表1常见临床讲解疑似有伤寒N级=60)
临床演示 病人临床演示 病人不做临床介绍 病人总数N级=60
发热 60(100%) 0(0%) 60(100%)
腹痛 45(75%) 15(25%) 60(100%)
Nausea 38(63.33%) 22(36.66%) 60(100%)
呕吐物 40(66.66%) 20(33.33%) 60(100%)
腹泻 35(58.33%) 25(41.66%) 60(100%)
便秘 15(25%) 45(75%) 60(100%)
咳嗽 40(66.66%) 20(33.33%) 60(100%)
Chest不适 34(56.66%) 26(43.33%) 60(100%)
酸喉咙 37(61.66%) 23(38.33%) 60(100%)
迭代舌头 42(70%) 18(30%) 60(100%)
厌食症 54(90%) 6(10%) 60(100%)
弱性 58(96.66%) 2(3.33%) 60(100%)

Typhoid被发达国家居民视为过去疾病由系统化、人性化和传染性疾病沙门氏菌印地语.细菌以高度适配方式具体影响人欠发达国家习惯性更高,人口超载和不适当卫生常见[15]

分子免疫学在发现敏感和特殊标志方面取得了进展沙门氏菌印地语.使用这些工具箱经济实事求是地快速解析伤寒[16]血清类型印地语外膜蛋白为50kDa由Ismail等检测并用d-enzyesay技术检验抗原并发现该抗原可与因产生免疫球素M和G发生反应沙门氏菌印地语血清中的急性伤寒热[17]OMP从细菌中的其他抗原中显出,这些抗原有体性(O)、Flagellar(H)或Capsilar(Vi)。从当前写作中解析 webhidot是最合适的确认伤寒测试prashidotIgm阳性表示疾病早期阶段,而Igm和IgG在中度感染中均呈阳性IgG抗体不表示急性感染,因为它们在病人血清中持续约2年感染[12]rapsidot结果可能因地形变化,因为外膜蛋白分解沙门氏菌印地语.[18].对比prashidot结果(如图1b所示)时,包括65名病人的另一项研究显示IgG和Igm在39个样本中均有正结果,Igm在24个样本中有正结果,IgGG在2个样本中有正结果。正因如此报告 webhidot百分百敏感和80%特殊性 与血液文化对比

本研究显示,结果按发烧持续时间排列时有显著模式(图2ab和3b)。与Jaffery等报道中发烧时间小于7天N级=22,1055.56%为Widal正数,1266.67%为prashidot正数例7-14天疾病N级83)38Widal正数和45(80.36%)prashidot正数14天以上患病者(++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++14N级=44,24(82.76%)Widal正数和20(68.97%)bashidot正数prashidot显示上值敏感度和特性Widal测试[16]另一项评价显示,bashidot头七天高敏感度似乎原因在于,当执行bashidot时,我们主要关心IgM结果,IgM是第一批感染后释放的抗体IgG级后可检测Widal测试中Oaglutinins约8天观察,Haglutinins约10-12天[20]观察

欠发达国家使用Widal测试百余年,但由于敏感度低、特性差和正预测值差[21],它作为诊断工具的优势有限敏感度下降,因为Widal测试可能在长潜段后为阳性特殊性降低,如果复发或病人使用TAB疫苗或有能力应对其他粒子负感染血液培养测试与任何血清测试合并时,通常会提供更好的诊断结果,具体指那些部分处理案例行为测试方法可以是将bashidot与那些已经接受抗生素[22]的儿童的血液文化结合起来例行推荐Widal测试通常在感染的第一周不产生正结果,因为它依赖增加的ti百分百检测抗生素敏感度其缺陷再次延迟解释结果,即72小时文化结果受到严重影响,如果事先使用抗生素克服这些缺陷,最近发现Sercology测试如prashidot和Tubex测试识别抗体对抗伤寒帮助及早诊断沙门氏菌印地语.台风热20分钟内使用prashitot测试诊断yashidot作用在诊断伤寒发烧方面相当深入实战易行,结果快速解析[12]不需要ELISA阅读器评价结果很容易从测试条上看到点操作员训练少很容易完成在发展中国家劝告测试的障碍是测试成本比Widal测试多,测试试剂必须放入冷存储器 [22]

伤寒热诊断比Widal测试要好得多,因为它敏感易操作,早期检测案例并在同一天提供结果Igm测试比IgG多 意指急性感染案例比慢性感染案例多

道德审核

道德认证取自儿童医院接受所有主体的知情同意

旁遮普大学儿童医院管理部 帮助研究

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