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提交:2019年10月29日|得到正式认可的：2019年11月8日发表:2019年11月11日
如何引用这篇文章:Silva Nd，Nobre D，Dos Santos Jn，Rezende Ms，Pinheiro LHS，等。SDS-PAGE来自MDS，Young和老年患者血浆蛋白的相关性。int j骨髓res。2019年;2：087-088。
DOI:10.29328 / journal.ijbmr.1001009
ORCiD:orcid.org/0000 - 0001 - 9668 - 1514
版权:©2019 Silva Nd等人。这是在Creative必威体育西汉姆联 Commons归因许可下分发的开放式访问文章，其允许在任何介质中不受限制使用，分发和再现，只要原始工作被正确引用。
SDS-page分析MDS与年轻、老年患者血浆蛋白的相关性
Nathanielly de Lima Silva1达尼洛诺1，Josiel Nascimento Dos Santos2， Márcia Santos Rezende1， Lúcio Henrique Sousa Pinheiro1，卡洛斯亚瑟卡多斯almeida2还有达尔斯·玛尔塔·斯米格尔1*
1塞尔加西大学，SãoCristóvão，Sergipe，巴西的药房。
2阿拉格斯联邦大学药理学研究所，Maceió，巴西阿拉格斯
*通信地址:Dulce Marta Schimieguel，美国联邦塞尔加西大学药房系，SãoCristóvão，Sergipe，巴西，电话：+ 55 79 3194-6319;电子邮件：dulcemarta@hotmail.com;hematox2017@hotmail.com.
概括：骨髓增生异常综合征(MDS)是一组异质性的克隆性造血恶性肿瘤，其特征是进行性细胞减少、造血功能无效、骨髓细胞过多并转化为急性髓系白血病(AML)。
目的:通过SDS-Page识别MDS患者和两个健康对照组(年轻人和老年人)的血浆蛋白。
方法:来自08健康的年轻，08年健康老年人和08名MDS患者的等离子体用于本研究。蛋白质分离，沉淀，用于SDS-PAGE凝胶分析，用Comassie辉煌的蓝色染色，分析扫描和带。
结果:在20%的部分和上清液中都可以识别出在每组中有差异表达的蛋白质。那些已经显示出一些临床相关性的。纤维连接蛋白仅在青年对照组中高表达。α2-巨球蛋白在两个对照组中均有表达，但在MDS组中无表达。触珠蛋白仅在老年对照组和SMD组中高表达。
结论:血浆中的蛋白质表达可以是MDS的生物标志物，并且可能在衰老和血液学恶性肿瘤发育过程中发挥关键作用。
最近，医学在治疗多种癌症方面取得了很大进展。另一方面，MDS和AML仍然是最不利的血液系统恶性肿瘤之一，预后差。因此，老年MDS患者继续存在大量问题，其中衰老是主要的预后因素之一[1,2]。
大多数患者在60岁时确诊，发病率最高的是70 - 75岁左右。年龄是许多类型癌症发展的主要因素之一，如MDS。尽管如此，其他的危险因素也可以随着年龄的增长进行评估，如环境、细胞和遗传因素[3]。
MDS诊断包括对外周血和骨髓的定量和定性分析。骨髓活检，细胞遗传学，分子分析和通过流式细胞术中的免疫蛋白分型用于证实诊断。然而，通常很难阐明MDS诊断，即使是最专家的专业人士也是[4]。
有几种与这种疾病的生物功能相关的分子标记，但很少有效蛋白质。事实上，已经研究了几种不同MDS亚组的血浆蛋白质蛋白质，并与健康供体的血浆蛋白质组进行了研究，但是由此产生的数据尚不清楚，可用于诊断生物标志物候选者的选择和提议[5]。
联邦塞尔加西大学的人伦理委员会研究批准的议定书：3.225.938。共有24项受试者，所有女性，分为三组：08健康年轻，年龄从20到30岁命名为年轻群体;08年龄健康老年人，年龄范围从60岁到80岁，名叫老年人和08名SMD患者，年龄从19到86岁到达，名为SMD集团。
在EDTA管中采集10ml血液。血浆分离并在-80°C冷冻直到分析。蛋白质被分离和沉淀。20%提取液和上清液进行SDS-PAGE凝胶分析。样品定量[6]，(Bradford法)，30 ng应用于10%聚丙烯酰胺凝胶。凝胶在100v下运行1,5h，随后用科马西亮蓝G-250进行染色，扫描并分析条带。
SDS-PAGE蛋白筛选结果显示，03组分析的血浆中有可能鉴定出不同方式表达的蛋白。
在20%的部分和上清液中都可以识别出在每组中有差异表达的蛋白质。那些已经显示出一些临床相关性的。纤维连接蛋白仅在青年对照组中高表达。α2-巨球蛋白在两个对照组中也有表达，但在MDS组中没有表达。结合珠蛋白仅在老年对照组和MDS组中高表达，如图1所示。
图1：Coomassie辉煌的蓝色染色SDS-PAGE凝胶。幼小沉淀：血浆池的年轻人，20％沉淀（NH4）2SO4;年轻上清液：血浆池池幼苗，留下20％降水后留下（NH4）2SO4;MDS沉淀物：疑似MDS的血浆池，20％沉淀（NH4）2SO4;MDS上清液：疑似MDS患者血浆池，沉淀20％后留下的上清液（NH4）O4;老年人沉淀：老年人血浆池，20％沉淀（NH4）2SO4;老年人上清液：老年人血浆池，留下20％沉淀后的上清液（NH4）2SO4;年轻的纯等离子体：血浆池的年轻人没有（NH4）2SO4添加。
纤维连接蛋白是一种血浆蛋白，通常与细胞粘附、生长、迁移和分化等多种不同的生物学功能有关，这证明了其在年轻人中的高表达高于老年人。在癌症和其他病理情况下，纤维连接蛋白的表达减少，同时降解增加，这些结果也显示了这一点。α2-巨球蛋白除了具有多种功能外，还是主要的血浆抗蛋白酶之一。它还通过与多种细胞因子和/或受体结合在炎症过程中发挥重要作用，它也与衰老和癌症有关。这也许可以解释这项研究的结果。触珠蛋白是一种四聚体血浆蛋白，与血红蛋白具有高亲和力。由于结合珠蛋白水平在各种病理条件下升高/降低，它具有临床重要性，可作为诊断和预后指标。最近，有报道说，触珠蛋白的增加与年龄呈正相关，与成人的参考值相比，在年轻人中触珠蛋白浓度较低。结果与我们在这里的发现相似。
SGS-PAGE凝胶电泳可以是一种廉价且强大的工具，可以区分血浆级分中的蛋白质表达并从健康和MDS患者沉淀出来;存在可能在衰老和癌症过程中发挥关键作用的蛋白质，因此可能与MDS发育有关。但是，必须进行进一步的研究以得出结论。
这项工作得到了Conselho Nacional de DesenvolvimentoCientíficoeTecnológico - CNPQ（Proc.Cop。Proc。Proc。Proc.306464 / 2016-0和423833/2018-9）和FundaçãodeApoioàPesquisaEànovaçãoTecnológicado Estado de Sergipe（Fapitec / Se））。
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- 利用蛋白质-染料结合原理的一种快速、灵敏的微量蛋白质定量方法。分析生物化学,1976;72: 248 - 254。PubMed：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/942051